El ácido oxolínico tiene un amplio espectro y tiene un fuerte efecto antibacteriano sobre las bacterias gramnegativas y algunas bacterias positivas. El ácido oxolínico es un antibiótico quinolona utilizado para estudios sobre el bobinado y enrollado de ADN y para estudios sobre procesos de neurotransmisión dopaminérgica. Se utiliza para estudiar nuevos mecanismos de resistencia transmisibles qnrA, qnrB, qnrS y aac(6′) Ib-cr, en Escherichia.